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十八烷基硅烷键合硅胶柱硅胶层析时如何装柱News
十八烷基硅烷键合硅胶柱硅胶层析时如何装柱
发布时间:2017-12-23 点击次数:417次
   十八烷基硅烷键合硅胶柱利用吸附原理,即利用硅胶对中药混合物中各种成分吸附能力的差异,而使混合物中各成分得以分离的色谱方法。
  十八烷基硅烷键合硅胶柱层析操作装柱的方法:
  装柱前柱底要垫一层脱脂棉以防吸附剂外漏。具体有干法装柱和湿法装柱两种方法:
  1.干法装柱:将硅胶通过漏斗装入柱内,中间不应间断,形成一细流慢慢加入管内。也可用橡皮槌轻轻敲打柱硅胶柱使硅胶装填连续均匀、紧密。柱装好后,打开下端活塞,然后倒入洗脱剂洗脱以排尽柱内空气,并保持一定液面。
  2.湿法装柱:将zui初准备使用的洗脱剂装入柱内,打开下端活塞,使洗脱剂缓慢流出。然后把硅胶慢慢连续不断地倒入柱内(或将硅胶与适量洗脱剂调成混悬液慢慢加入柱内),硅胶依靠重力和洗脱剂的带动,在柱内自由沉降,此间要不断把流出的洗脱剂加回柱内保持一定的液面,直至把硅胶加完并在柱内沉降不再变动为止。然后在硅胶上面加一小片滤纸或少许脱脂棉。根据加样量控制洗脱剂液面至一定高度。
  注意:
  1.柱色谱分离能力比薄层分离能力强,效果更好,尤其对结构相似、性质接近、采用薄层难以分离的成分分离效果好。
  2.洗柱子能不用含水的混合溶剂,就尽量不要用。

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